中国科学家团队开发出简便高效的多基因编辑载体克隆方法

　　华中农业大学园艺林学学院李峰团队开发出简便高效的多基因编辑载体克隆方法，研究成果于2023年10月10日在Plant Biotechnology Journal(IF 13.8)上在线发表。研究人员对原始的sgRNA骨架序列进行了定点突变和随机突变并鉴定得到了大量的sgRNA骨架变异序列。之后利用不同的骨架变异序列和不同的tRNA通过融合PCR成功得到包含9个sgRNA的sgRNA簇。结合Goldengate克隆技术一步反应构建出表达24个sgRNA的多基因编辑载体。将得到的含有24个sgRNA簇的多基因编辑载体在番茄内进行功能测试，结果显示，在T0代中共检测到10个靶基因发生编辑。该研究开发了一种简便高效的多基因编辑载体克隆方法，为番茄及其他作物的基因功能研究和遗传改良提供了有力的工具。